بررسی اثرات میتوژنی فیتوهماگلوتینین (PHA-P) و لیپوپلی سارکارید (LPS) استخراج شده از باکتری E. coli ؛ بر شاخص میتوزی لنفوسیتهای کشت داده شده تاسماهی شیپ (Acipenser nudiventris ) دریای خزر

نوع مقاله : مقاله پژوهشی

نویسندگان

چکیده

 



به رغم کاربردها و مزایای فراوان کشت لنفوسیتهای خون در ماهیان، پایین بودن شاخص میتوزی در لنفوسیتهای کشت داده شده یکی از مشکلات موجود در این روش می باشد که این مشکل را با افزودن مواد محرک تقسیمات میتوزی میتوژن می توان تا حد زیادی برطرف نمود. البته در این ارتباط نوع و غلظت مواد میتوژن مورد استفاده بسیار مهم می باشد. پس از اینکه Nowell در سال 1960کشف کرد ماده فیتوهماگلوتینین می تواند تقسیمات میتوزی را در لنفوسیتهای انسان تحریک کند، بعدها محققین مختلف این ماده را بعنوان ماده میتوژن در کشت لنفوسیتهای ماهیان مختلف از جمله تاسماهی سفید transmontanus Acipenser (1998 Eenennaam et al.،)، ماهی ازون برون Acipenser stellatus و فیلماهی Huso huso Nowruzfashkhami & Khosroshahi، 1999))، تاسماهی ایرانی Acipenser persicus (2000 Nowruzfashkhami et al.،)، ماهی بستر (Huso huso × Acipenser sturio) و تاسماهی سفید (2001 Fujiwara et al.،) بکار بردند. تعدادی از محققین نیز ماده LPS را بدین منظور استفاده کردند. 
در این تحقیق ضمن بدست آوردن بیشترین شاخص میتوزی در لنفوسیتهای کشت داده شده تاسماهی شیپ با استفاده از دو ماده میتوژن فیتوهماگلوتینین (PHA-P)و ماده لیپوپلی ساکاریدی (LPS) استخراج شده از باکتری E. Coli، روش کشت گلبولهای سفید خون این ماهی نیز به منظور بدست آوردن تعداد زیادی گسترش کروموزومی با کیفیت مناسب بهینه گردید.

کلیدواژه‌ها


عنوان مقاله [English]

MITOGENIC EFFECTS OF PHYTOHEMAGGLUTININ (PHA-P) AND LIPOPOLYSACHARIDE EXTRACTED FROM E.COLI ON CULTURED LYMPHOCYTE OF THE CASPIAN SEA SHIP STURGEON (ACIPENSER NUDIVENTRIS)

نویسندگان [English]

  • M. Noroz fashkhami
  • Sh. Safaeian
  • M. Bahmani
  • F. Chobian
چکیده [English]

The present study was designed to obtain the most effective dose for phtytohemagglutinin (pHA-P) and lipopolysaccharide (LPS) extracted from E. coli to optimize the lymphocyte culture method, the highest mitotic index (MI) and metaphase plates number of ship sturgeon, Acipenser nudiventris. Twenty specimens of two-year old A. nudiventris weighing on average 137g and with an average length of 32cm were used in this study. Different doses (0, 40, 60 and 80 mgmrl) of PHA-P, LPS and a combination of the most effective dose of both mitogenic factors {(40 mgmr -1) PHA-P + (80 mgmr -1) LPS} were added to the culture media and mitotic indices were calculated for each treatment.
Results indicated that a dose of 40 
mg mr-1 PHA-P and 80 mg mr-1 LPS produced the highest MI (6.26 and 3.02 respectively). Using higher concentrations of PHA-P and LPS resulted in decreased MI, whereas at lower doses of these mitogenic factors, mitotic arrest of cultured lymphocytes was observed. Using a combination of the most effective dose of the two mentioned mitogens {(40 mgmr -1) PHA-P + (80 mgmr -1) LPS} yielded a MI of about 3.84. A dose of 40 mg mr-1 PHA-P produced the highest MI (6.26), the highest number of lymphocytes was cultured and the largest number of metaphase plate was counted.

کلیدواژه‌ها [English]

  • MITOSIS INDEX
  • Ship sturgeon
  • Acipenser nudiventris
  • PHA-P
  • LPS