بررسی امکان تشخیص جنسی فیل ماهی (Huso huso) یا استفاده از روش PCR-RAPD

نوع مقاله : مقاله پژوهشی

نویسندگان

1 خرمشهر

2 رشت

3 نور

چکیده

 



هدف از انجام این تحقیق مقایسه ژنوم فیل ماهی نر و ماده با استفاده از روش RAPD و شناسایی نشانگرهای جنسی بود. به همین منظور پس از استخراج DNA به روش فنل - کلروفرم، دو خزانه از DNA ژنومی افراد نر (ترکیبی از DNA پنج عدد نر) و ماده (ترکیبی از DNA پنج عدد ماده) مهیا گردید. در این تحقیق از 310 پرایمر 10 نوکلئوتیدی مورد آزمایش، 303 پرایمر باند تولید نموده و 7 پرایمر دیگر هیچگونه باندی تولید نکردند که می تواند به دلیل نامناسب بودن شرایط واکنش PCR و یا عدم وجود محل پهلوگیری برای پرایمرهای مذکور در ژنوم فیل ماهی باشد. الگوی باندی کلیه پرایمرهای مورد بررسی به جز پرایمر شماره 295 (OPT-17) در جنس نر و ماده یکسان بود و هیچگونه تفاوتی مشاهده نگردید. این پرایمر باندی را در خزانه DNA ژنومی افراد نر تولید نمود که در الگوی باندی جنس ماده مشاهده نمی شد. به منظور اطمینان از اختصاصی بودن این باند در جنس نر، آزمایش PCR با استفاده از پرایمر مذکور و بررسی DNA غیر ترکیبی افراد مستقل انجام شد که نتایج نشان داد باند مذکور مربوط به تنوع فردی بوده و در هر دو جنس دیده می شود. در مجموع، بررسی 4146 باند شمارش شده بر روی ژل پلی آکریلامید نشان می دهد که هیچکدام از باندهای مذکور نشانگر جنسی فیل ماهی نمی باشد. همچنین نتایج این تحقیق نشان می دهد که احتمالا کروموزومهای جنسی در فیل ماهی وجود نداشته و در صورت موجود بودن، نقاط متمایز بسیار کمی بر روی آنها قرار دارد و یا اصولا این ماهیان دارای قابلیت ژنتیکی همزمان برای دو جنس هستند.

کلیدواژه‌ها


عنوان مقاله [English]

THE POSSIBILITY OF SEX IDENTIFICAFLON IN BELUGA (HUSO HUSO) BY USING PCR-RAPD TECHNIQE

نویسندگان [English]

  • S. Keyvan shokoh 1
  • M. Pourkazemi 2
  • M. Kalbasi 3
1 Khoramshahr
2 Rasht
3 Noor
چکیده [English]

The goal of this study was to find a sex-specific DNA sequences in the male and female genomes of beluga (Huso huso), by random amplified polymorphic DNA (RAPD) assays performed on pooled DNA samples. Of the 310 different primers was tested, 7 primers produced no band. The most likely possibility is that PCR conditions have not been suitable for these 7 primers. It is also possible that these RAPD primers did not find suitable binding position to generate fragments. A single band was produced by primer 295 (OPT -17) which was specific to the male DNA. Further analysis of individual male and female beluga demonstrated that this primer yeilded a product that were in fact variable and reproducible, but were the result of variation in some individual males and females and not male-specific. Therefore, of the 4146 RAPDs scored, none were tightly linked to a sex-determining gene. The results support the idea that sex chromosomes are either not present or they weakly differentiated in the genome of beluga.

کلیدواژه‌ها [English]

  • Beluga
  • Huso huso
  • Acipenseridae
  • RAPD
  • SEX MARKER
  • Caspian Sea
  • Iran