جداسازی و شناسایی سیست Dunaliella salina (Chlorophyceae) از رسوبات ساحلی لیپار (دریای عمان) با استفاده از آنالیز مولکولی

نوع مقاله : مقاله پژوهشی

نویسندگان

چکیده

ته­نشین می­شوند و تحت شرایط مساعد مجدداً شکوفا شده و به ستون آب برمی­گردند. بمنظور شناسایی دقیق مورفولوژی، گونه­های فیتوپلانکتون­ در دو مرحله­ی سیست و متحرک بررسی گردیدند زیرا برخی از سیست­های مشابه به فیتوپلانکتون­ متفاوتی تبدیل می­شوند. هدف از این تحقیق، کشت سیست­های موجود در رسوبات خلیج چابهار منطقه لیپار و شناسایی نمونه­های شکوفا شده می‌باشد. رسوبات از منطقه لیپار در سال 1394 توسط Ekman Grab با سطح جمع کنندگی 225 سانتی‌متر مربع جمع‌آوری گردید. سیست زنده گرد ناشناخته بصورت انفرادی از رسوبات جدا­سازی شد و در فایکولب در شرایط کاملاً استریل ب‌صورت جداگانه تحت شرایط 12 ساعت روشنایی و 12 ساعت تاریکی در درجه حرارت °C1±25 در محیط کشت F2، کشت داده شدند. بررسی مورفولوژی گونه شکوفا شده نشان داد که سیست جدا شده متعلق به گونه Dunaliella salina می‌باشد. جهت تائید شناسایی استرین خالص حاصل از کشت سیست مورد­نظر، استخراج DNA و سپس واکنش زنجیره­ای پلی­مراز (PCR) انجام گردید. توالی ژنی گونه D. salina با توالی ژنی گونه­های مشابه از بانک ژن مقایسه گردید. بررسی مولکولی و فیلوژنی گونه نشان­ داد که گونه شکوفا شده از نظر توالی نوکلئوتیدی بیشترین شباهت را با گونه D. salinaدارد. همچنین، این مطالعه نشان داد که ‌گونه D. salina از سواحل جنوب ایران توانایی تولید سیست را دارد.
 

کلیدواژه‌ها


عنوان مقاله [English]

Isolation and molecular identification of Dunaliella salina (Chlorophyceae) cyst from sediments of the Lipar coast (Oman Sea)

نویسندگان [English]

  • G Attaran Fariman
  • P Sadeghi
  • R Shirzaie
چکیده [English]

sexual life cycle produce resting cyst that settle to the bottom sediments and become motile in the water column when suitable conditions provided. Phytoplankton species were studied in two stages of motile and cyst for accurate identification of morphology, because some similar cysts may convert to a different phytoplankton and vice versa. The objectives of this study were to culture cysts that isolated from sediments of Lipar zone located in the southeast coast of Iran and to identify excysted samples. Sediment samples from Lipar zone were collected by Ekman grab with 225 cm2 area in 2015. Unknown live and orbicular single cysts were isolated from sediments and cultured in sterile conditions in phycolab using f2 medium under 12 hours light and 12 hours dark cycles at 25±1°C. Assessment of excysted plankton morphology revealed that the cyst is belonged to Dunaliella salina species. In order to confirm this morphological identification, DNA of the plankton was extracted and PCR was performed. The sequence of the sample was compared with the sequences of the similar species from GenBank. Phylogeny and molecular analysis confirmed this identification. The present study revealed that D. salina from the south coast of Iran was able to produce resting cyst. 

کلیدواژه‌ها [English]

  • Dunaliella salina
  • Cyst
  • phylogeny
  • Sediment
  • South Coast of Iran